制備型高效液相色譜柱的填料通常是粒徑較大的球形顆粒,如 5 μm、10 μm 等,這樣可以提高柱效和載樣量,但也會導致色譜柱的滲透性降低,因此需要使用高壓泵和高流量的溶劑來保證流動相的充分滲透和樣品的充分洗脫。
對于 C18 色譜柱,制備型的填料通常是鍵合了十八烷基的硅膠,這種填料具有良好的疏水性和親脂性,可以用于分離和純化親脂性化合物,如藥物、生物大分子等。
在制備型高效液相色譜柱的制備過程中,需要注意以下幾點:
1. 填料的選擇:需要根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)和色譜柱的使用目的來選擇合適的填料,如粒徑、孔徑、碳鏈長度等。
2. 色譜柱的裝填:需要使用高精度的裝柱設(shè)備和技術(shù),保證填料的均勻分布和緊密堆積,以提高柱效和載樣量。
3. 色譜柱的測試:需要對制備好的色譜柱進行測試,包括柱效、分離度、保留時間等,以確保其符合使用要求。
4. 流動相的選擇:需要根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)和色譜柱的使用目的來選擇合適的流動相,如溶劑種類、比例、pH 值等。
總之,制備型高效液相色譜柱的制備需要一定的專業(yè)知識和技能,如果沒有經(jīng)驗,建議購買商業(yè)化的制備型高效液相色譜柱,或者尋求專業(yè)人士的幫助。
發(fā)布于: 2023-08-28