新購買的 C18 色譜柱需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)幕罨途S護(hù),以確保其性能和壽命。以下是 C18 色譜柱活化的一般步驟:
1. 清洗:首先,使用 HPLC 級別的溶劑清洗色譜柱,以去除可能存在的污染物和殘留物。通常使用甲醇或乙腈作為清洗溶劑,清洗時(shí)間約為 30 分鐘。
2. 平衡:然后,使用流動(dòng)相平衡色譜柱,以確保固定相完全潤濕。通常使用與樣品相同的流動(dòng)相進(jìn)行平衡,平衡時(shí)間約為 1-2 小時(shí)。
3. 流量控制:在平衡過程中,應(yīng)控制色譜柱的流量,以確保其在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)。通常,流量應(yīng)控制在約 1-2 mL/min。
4. 溫度控制:如果使用溫度控制設(shè)備,應(yīng)將色譜柱的溫度設(shè)置在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)。通常,C18 色譜柱的最佳溫度為 30-40°C。
5. 樣品注入:在注入樣品之前,應(yīng)確保色譜柱已經(jīng)充分平衡,并且流量和溫度已經(jīng)穩(wěn)定。樣品的注入量應(yīng)適當(dāng),以避免過載和污染。
6. 清洗:樣品注入后,應(yīng)使用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱,以去除殘留的樣品和溶劑。通常使用與樣品不同的溶劑進(jìn)行清洗,清洗時(shí)間約為 30 分鐘。
7. 保存:最后,使用適當(dāng)?shù)娜軇┍4嫔V柱,以防止固定相干燥和污染。通常使用甲醇或乙腈作為保存溶劑,并在色譜柱兩端密封以防止空氣進(jìn)入。
需要注意的是,不同的色譜柱可能需要不同的活化和維護(hù)步驟,因此建議在使用前仔細(xì)閱讀相關(guān)的說明書和文獻(xiàn),以確保正確地活化和維護(hù)色譜柱。
發(fā)布于: 2023-08-26