C18 色譜柱是高效液相色譜(HPLC)中最常用的一種色譜柱,它的分離原理基于吸附色譜和分配色譜的原理。
在吸附色譜中,固定相是一種吸附劑,它能夠吸附樣品中的各個組分,使得各個組分在固定相和流動相之間的分配系數(shù)不同,從而實現(xiàn)分離。在 C18 色譜柱中,固定相是由硅膠或其他吸附劑表面鍵合了十八烷基(C18)官能團的吸附劑組成的。C18 官能團具有親水性,可以與流動相中的水分子相互作用,從而在流動相和固定相之間形成一層水膜。
當樣品流經(jīng) C18 色譜柱時,樣品中的各個組分會與固定相上的 C18 官能團相互作用,使得各個組分在固定相和流動相之間的分配系數(shù)不同。分配系數(shù)越大的組分,在固定相上的保留時間越長,從而在色譜圖中出現(xiàn)的時間越晚。而分配系數(shù)小的組分則會在流動相中更快地移動,在色譜圖中出現(xiàn)的時間越早。
此外,C18 色譜柱還可以通過改變流動相的組成和 pH 值等參數(shù),調節(jié)樣品中各個組分與固定相之間的相互作用,從而實現(xiàn)更好的分離效果。例如,在酸性流動相中,弱堿性化合物的保留時間會延長,從而提高它們的分離效率。
總之,C18 色譜柱的分離原理是基于吸附色譜和分配色譜的原理,通過樣品中各個組分與固定相上的 C18 官能團相互作用,實現(xiàn)不同組分的分離。通過改變流動相的組成和 pH 值等參數(shù),可以調節(jié)樣品中各個組分的保留時間和分離效率,從而實現(xiàn)更好的分離效果。
發(fā)布于: 2023-08-28