C18 色譜柱是液相色譜中常用的固定相之一,為了確保其性能和壽命,需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)幕罨?。以下?C18 色譜柱活化的一般步驟:
1. 清洗:使用 HPLC 級(jí)別的溶劑清洗色譜柱,通常是先用甲醇或乙腈沖洗,再用色譜柱說(shuō)明書(shū)中指定的溶劑沖洗。沖洗時(shí),流速應(yīng)適當(dāng),不宜過(guò)快或過(guò)慢,一般為正常分析流速的 2-3 倍。
2. 平衡:將清洗后的色譜柱與液相系統(tǒng)連接,使用流動(dòng)相平衡色譜柱。平衡時(shí)間一般為 30 分鐘到 1 小時(shí),直到基線穩(wěn)定。
3. 逐漸升高溫度:在平衡過(guò)程中,逐漸升高色譜柱的溫度,通常從室溫升高到 40-60℃,并保持一段時(shí)間,以激活固定相。
4. 沖洗:活化完成后,使用流動(dòng)相再次沖洗色譜柱,以去除固定相表面的殘留物和激活劑。沖洗時(shí)間一般為 30 分鐘到 1 小時(shí)。
需要注意的是,不同品牌和型號(hào)的色譜柱活化方法可能會(huì)有所不同,因此在進(jìn)行活化前,請(qǐng)仔細(xì)閱讀相關(guān)的說(shuō)明書(shū)或咨詢廠家技術(shù)支持。此外,在活化過(guò)程中,應(yīng)避免流動(dòng)相的氣泡和雜質(zhì)的進(jìn)入,以保證色譜柱的性能和壽命。
發(fā)布于: 2023-08-26