??????? 近年來，為減少分析時間和提高分析通量而誕生的超高效液相色譜技術取得了令人矚目的發(fā)展。超高效液相色譜儀器能夠承受更高系統(tǒng)壓力和流速，并且分析速度和效率大大提升；檢測器模塊的改進和新的數(shù)據(jù)處理算法也有效提升信號采集的速率；現(xiàn)代色譜柱技術的發(fā)展，即使是很短的柱長也能提供足夠高效色譜分離效率，比如恒譜生液相色譜柱有30、50、75、100、150、200、250和300mm等多種長度。高效的分離技術歸功于液相硅膠色譜填料，通過恒譜生的先進的技術處理，金屬含量極低的99.9%超高純度球型多孔硅膠在孔徑、孔體積、比表面積、碳含量、金屬離子含量、峰型對稱度等都有統(tǒng)一管理和質量保障。
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??????? 對液相色譜技術的研究有許多方向，其中提高通量是能夠提升液相色譜分析速率的重要研究方向。在標準儀器操作模式下，自動進樣器序列發(fā)生在每次進樣之前。該順序通常包括將針頭移至指定的樣品瓶位置、取樣、移回進樣器閥以及一系列針頭清洗以減少樣品殘留。這種方法有很多限制和操作步驟，可能會增加儀器循環(huán)時間，從而降低整體分析通量。
??????? 這里介紹一下多次進樣技術，同步進樣循環(huán)樣品制備的一個變化是單次實驗運行中的多次進樣 (MISER) 技術。在 MISER 中，多次進樣以與上述相同的方式運行，但數(shù)據(jù)不是作為單獨的色譜圖收集的，而是收集在單個數(shù)據(jù)文件中。這是定性工作的理想策略，其中進樣序列中的一系列運行的快速比較可以快速識別樣品組中的一般趨勢和異常值（即高豐度和低豐度峰）。
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??????? MISER 的主要缺點是和每個獨特的運行收集單獨的色譜圖相比，峰量化的難度增加。許多用于定量的軟件算法使用特定保留時間（和/或 m/z 值，取決于檢測模式）下分析物峰和內(nèi)標峰之間的面積比較，當多個單獨的分離全部完成時，這可能更難合并繪制在單個色譜圖上。雖然它仍然可以通過液相色譜圖拆分程序或手動處理來完成，但這些策略需要更多的用戶交互以確保所有峰都正確匹配。
??????? 隨著高通量篩選實驗中運行次數(shù)的增加，整體工作量顯著增加。因此，重要的是要考慮正在進行的高通量實驗的總體目的，更具體地說，它們是定性的還是定量的，以確定哪種方法最適合減少循環(huán)時間。
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發(fā)布于: 2021-12-31