??????? UHPLC是一種專門(mén)的色譜方法，與 HPLC 相比，它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過(guò)使用填充較小顆粒（通常直徑小于 2 μm）的較小色譜柱來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無(wú)論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學(xué)物質(zhì)。
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??????? 盡管 UHPLC 的性能明顯更好，但它并不總是最佳選擇。在您考慮改用 UHPLC 時(shí)，恒譜生將幫助您區(qū)分重要和不重要的內(nèi)容。
???????? 一、為什么選擇 UHPLC？
??????? 盡管 UHPLC 和 HPLC 在各種情況下都有優(yōu)勢(shì)，但如果您在五分鐘內(nèi)分離兩種組分并且每天只進(jìn)行幾次分析，則不太可能需要 UHPLC，因?yàn)?HPLC 的分離度既足夠又相對(duì)快速。
??????? 即使您不需要更高的分離能力，UHPLC 仍然可以提高您的通量。與 HPLC 色譜柱相比，uhplc更高的色譜分離度可用于提高復(fù)雜樣品的分離能力，或通過(guò)使用更短的色譜柱并保持分離度來(lái)提高分析速度。
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??????? 二、然而，UHPLC 并非沒(méi)有缺點(diǎn)。由于 UHPLC 在色譜柱中使用較小的顆粒，因此不適用于臟污或未過(guò)濾的樣品。使用未過(guò)濾的樣品可能會(huì)導(dǎo)致色譜柱堵塞。可以使用恒譜生在線過(guò)濾器或者保護(hù)柱安裝在柱前進(jìn)行過(guò)濾，避免色譜柱堵塞。通常，UHPLC 需要更高的樣品和流動(dòng)相清潔度，這會(huì)增加溶劑和樣品制備的額外開(kāi)銷。
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??????? 三、選擇 UHPLC 的注意事項(xiàng)
???????? 因?yàn)?UHPLC 在色譜柱內(nèi)使用較小的顆粒，例如，需要更大的力來(lái)驅(qū)動(dòng)溶劑和樣品通過(guò)色譜柱。因此，UHPLC 需要能夠在比 HPLC 中使用的泵更高的壓力下工作的泵。
???????? 另一方面，雖然 UHPLC 系統(tǒng)的初始成本通常高于其對(duì)應(yīng)的 HPLC 系統(tǒng)，但總體擁有成本實(shí)際上可能更低。與 HPLC 系統(tǒng)相比，UHPLC 系統(tǒng)可以用更少的試劑產(chǎn)生更快的結(jié)果，并且增加的通量可以提高生產(chǎn)力。在這種情況下，UHPLC 系統(tǒng)較高的初始成本實(shí)際上可能會(huì)在幾年內(nèi)節(jié)省實(shí)驗(yàn)室資金。
???????? 四、未來(lái)發(fā)展
???????? 盡管存在差異，但新型柱填料開(kāi)始模糊 HPLC 和 UHPLC 之間的界限。例如，對(duì)于 HPLC 和 UHPLC，新的“核殼”或“多孔”顆粒提供比傳統(tǒng)柱顆粒更好的性能。核殼顆粒具有更大的表面積，這意味著它們?cè)谳^低的工作壓力下優(yōu)于傳統(tǒng)的顆粒表親。這意味著使用核殼顆粒（例如來(lái)自恒譜生的核殼顆粒填料，批次穩(wěn)定性一致，可重復(fù)利用），現(xiàn)在可以使用 HPLC 的較低壓力實(shí)現(xiàn) UHPLC 的“超”效率。
????????? 對(duì)于 HPLC 和 UHPLC，平衡設(shè)備成本和性能變得更加靈活。無(wú)論您需要簡(jiǎn)單的高通量分離還是更高的分離能力，UHPLC 都在不斷發(fā)展以滿足比以往更多類型的需求
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發(fā)布于: 2022-03-19